期刊简介
1953年8月创刊，中华医学会主办。本刊是我国口腔医学界公认的代表国家水平的学术刊物，具有较高的学术影响和权威性。读者为广大口腔医师。本刊有由国内著名权威专家撰写的“述评”、“专论”、“回顾与进展”、“专家笔谈”；有中华口腔医学会各专业委员会拟订的“诊疗指南”；有具有学术导向性的“会议纪要”；有规范临床操作的各种系列“讲座”等，还有按专业分栏目的论著。本刊是中国生物医学核心期刊，被美国《医学索引》、荷兰《医学文摘》、美国《化学文摘》、俄罗斯文摘等10余个著名国际检索期刊和数据库收录。本刊一直保持着国家新闻出版署授予的“中国期刊方阵”（双效期刊）的荣誉称号；连续9次获得“百种中国杰出学术期刊”奖；连续3年获中国科协科技期刊精品工程项目资助。
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首页>中华口腔医学杂志
- 杂志名称：中华口腔医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1002-0098
- 国内刊号：11-2144/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国科协优秀科技期刊评比二等奖（1996）期刊收录：知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
表达双色荧光蛋白的RAW264.7单克隆细胞株的构建及鉴定
任蕾；王永强；Michael Glogauer
关键词：破骨细胞, 荧光蛋白, 超正电荷, 磷脂酰丝氨酸
摘要：目的 利用慢病毒载体(pVSVG)构建表达双色荧光蛋白的单克隆RAW264.7细胞株及其功能鉴定,以期实时检测它们在破骨细胞形成过程中的表达及动态变化.方法 利用pVSVG构建表达双色荧光蛋白的单克隆RAW264.7细胞株,采用激光扫描共聚焦显微镜活细胞成像技术连续动态观察RAW264.7细胞在NF-κB受体激活蛋白配体诱导下向破骨细胞形成的过程.采用抗酒石酸酸性磷酸酶染色(tartrate-resistant acid phosphatase staining,TRAP)及4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色对表达磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)与超正电荷的RAW264.7细胞株及破骨细胞进行功能鉴定.结果 联合转染的RAW264.7细胞株形态为圆形或椭圆形,为正常生长形态,且保留了良好的破骨细胞分化能力.超正电荷绿色荧光蛋白(+ 8-greenfluorescent protein,+8-GFP)主要表达在RAW细胞的质膜上,分布均匀;当破骨细胞形成后,+8-GFP在质膜上的荧光强度明显减弱;PS表达在RAW细胞的质膜上,但在破骨细胞形成后,PS不仅表达在质膜上,同时也分布在细胞质和细胞器上.活细胞成像观察发现破骨细胞融合可发生在贴壁状态下及单核与单核、单核与多核及多核与多核细胞之间,终形成巨大的多核破骨细胞,因此破骨细胞的融合具有反复性.结论 成功构建可同时表达双色荧光蛋白的单克隆细胞株,为在三维空间进一步研究膜融合过程中的各种蛋白质和其他分子的构象改变,以及它们之间的相互作用方式提供了平台.
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